返回上一页

Countstar细胞计数仪与传统计数法对比详解

为了保证后续实验的细胞品质,许多实验室会对细胞的浓度和活率进行检测,传统的方法是通过针对哺乳动物细胞的台盼蓝染料,针对酵母的美兰染料。两种染料都是染色细胞核的,当细胞存活时,膜具有选择透过性,染料无法进入细胞内。当细胞死亡后,膜的选择透过性失去,染料便可以进入细胞核将细胞染色。从而区分出细胞的死活。传统的血球计数板操作复杂,误差大已经越来越多的被自动化的细胞计数仪所取代。Countstar®系列细胞计数仪,具有多方面的特性,这项特性保证了计数结果的准确性和稳定性。


极其便捷的操作

     Countstar®细胞计数仪操作机器方便,只需要简单的三步就可以完成细胞浓度活率测定。


  您只需要上样20微升,将计数板插入仪器,点击开始20秒以内就可以得到细胞的浓度和活率


不需要人工调焦

       基于图像分析的计数仪都需要在正确的焦距下得到清晰的细胞图像,进而进行图像分析得到计数结果。如果焦距调整的不正确,将会严重的影响浓度及死活判断。下图就是一些列焦距错误的图片,如果焦距调整不当,会严重的影响死活的判断,影响计数结果的稳定性。Countstar®全系列细胞计数仪在使用过程中都无需进行人工调焦,极大程度的避免了焦距误差对于死活判定的影响。

 

焦距偏差或严重的影响死活判断


 

 

良好的景深性能

    当镜头对着某一物体聚焦清晰时,在镜头中心所对的位置垂直镜头轴线的同一平面的点都可以在胶片或者接收器上相当清晰的图像,在这个平面沿着镜头轴线的前面和后面一定范围的点也可以结成眼睛可以接受的较清晰的像点,把这个平面的前面和后面的所有景物的距离叫做相机的景深。

      对于细胞计数仪景深的意义在于可以可以在CCD上清晰成像的细胞悬液的深度。一般的计数板都有100-200微米的深度,如果镜头的景深性能不佳时,会使一些在景深范围以内的细胞无法成像。理想的计数仪应当是可以将整个计数板深度的内的细胞都清晰成像。景深受镜头焦距,物距,光圈大小CCD大小的影响。Countstar®细胞计数仪权衡各个因素,设计出大景深的成像系统,保证计数板内的细胞都可以清晰呈像,保证计数结果的稳定性与准确性。


多视野检测

    将一定体积的细胞悬液加入恒定的空间内时,伴随恒定空间内液体流速的差异,表现为细胞的分布密度会有轻微的差异,这个现象是无法完全避免的。在细胞计数之初,人们就考虑到了这个问题,标准的血球计数板操作需要统计4个角的细胞浓度然后求平均值。Countstar®全系列细胞计数仪,在大视野大统计量的基础上又引入了多视野检测,可以对于一个样品检测多个视野,软件自动求平均。在下图中上方live 3平均值,一共统计了3个不同的视野,然后自动计算平均值,可以看到下方三个视野的值高度接近,进一步求平均可以完全抵消细胞分布不均引起的误差。


 

极大的细胞抽样量


5*104

5*105

5*106

1*107

血球计数板

5

50

无法统计

无法统计

Countstar®

40

400

4000

8000

 

      Countstar®独特的镜头可以保证每一个计数的视野所采集到的细胞量远远的大于人工技术的结果。在104浓度时,血球计数板每一个视野只能采集到10个以内的细胞,而在106-107次方浓度时,视野中的细胞数目由太多也无法统计。使用血球计数板计数时需要将细胞浓度调节到105次方才能进行统计。在浓度调节过程中反复的稀释或浓缩操作会引入新的误差在105次方计数时,只计数两位数的细胞,一个细胞判定不同就会带来1—2%的误差。Coutstar®细胞计数仪极高的视野内采样量,在配合多视野检测,使得计数结果更加的准确稳定。


完善的杂质过滤功能

      Countstar®细胞计数仪可以有效区分细胞碎片及背景杂质,排除细胞碎片,背景杂质对于计数结果的影响。如下图所示,细胞计数结果中细胞碎片和背景杂质被自动去除。



 先进的结团校正功能

    在进行原代培养,或者细胞消化不完全是常常会产生细胞团块。使用血球计数板计数时,标准的操作要求将一个团块技术为一个细胞,但是这并不能表示细胞悬液的真实浓度。Countstar®细胞计数仪的分析软件,具有先进的算法,可以将团块中的细胞分辨出来,更加真实的反应您细胞的浓度与活率。



不同细胞计数仪的检测范围


浓度范围 
直径范围
活力范围
Countstar®
1*104-3*107
5-180微米 
0-100%
Countstar® Yeast
5*104-3*107
 2-180微米
 0-100%
Countstar® Aglae
5*104-5*107
 2-180微米




沪ICP备13047873-1号